WBP全身體積描記系統(tǒng)在過(guò)敏研究中的應(yīng)用

更新時(shí)間：2022-01-18 點(diǎn)擊次數(shù)：2103

超

敏

反

應(yīng)

超敏反應(yīng)（hypersensitivity）是一種異常、過(guò)高的免疫應(yīng)答，即機(jī)體與抗原性物質(zhì)在一定條件下相互作用，產(chǎn)生致敏淋巴細(xì)胞或特異性抗體，如與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合，可導(dǎo)致機(jī)體生理功能紊亂和組織損壞的免疫病理反應(yīng)。

Ⅰ型超敏反應(yīng)是指已致敏的機(jī)體再次接觸相同抗原后在數(shù)分鐘內(nèi)所發(fā)生的超敏反應(yīng) 。其主要特點(diǎn)是：①發(fā)生快，消退亦快；②主要由特異性 IgE 介導(dǎo)；③通常引起機(jī)體生理功能紊亂，一般不遺留組織損傷；④具有明顯個(gè)體差異和遺傳背景。

最近，Ⅰ型超敏反應(yīng)重燃了許多專家對(duì)皮膚免疫療法研究的熱情，作為皮下注射免疫療法的替代。在下列研究中，來(lái)自?shī)W地利薩爾斯堡大學(xué)生物科學(xué)系研究過(guò)敏與免疫學(xué)的Evgeniia Korotchenko等學(xué)者就采用了經(jīng)屋塵螨(HDM)誘導(dǎo)的肺炎小鼠模型，使用激光輔助表皮免疫治療法，探究激光對(duì)于促進(jìn)表皮過(guò)敏原特異性免疫治療的潛力，于2019年末發(fā)表了關(guān)于應(yīng)用激光表皮免疫治療法和除色屋塵螨提取物成功減輕過(guò)敏性肺部炎癥小鼠模型的過(guò)敏反應(yīng)的文章，相關(guān)研究成果已刊登于《EAACI歐洲biantai反應(yīng)和臨床免疫學(xué)會(huì)》期刊。

屋塵螨(HDM)在室內(nèi)環(huán)境中普遍存在，其過(guò)敏原是世界范圍內(nèi)過(guò)敏性鼻炎和過(guò)敏性哮喘的主要常年誘因。HDM過(guò)敏原的高致敏能力歸因于適應(yīng)性免疫系統(tǒng)和先天免疫系統(tǒng)的組合效應(yīng)。幾種HDM過(guò)敏原，包括兩種致敏率最高的屋塵螨過(guò)敏原Der p 1和Der p 2，通過(guò)蛋白酶激活受體和模式識(shí)別受體刺激先天免疫系統(tǒng)，促進(jìn)過(guò)敏免疫反應(yīng)。

該研究團(tuán)隊(duì)對(duì)經(jīng)屋塵螨(HDM)誘導(dǎo)的肺炎小鼠模型進(jìn)行了一系列的再刺激實(shí)驗(yàn)，比較了各治療組之間的療效，如激光表皮免疫療法(laser-facilitated EPIT)組、皮下免疫療法(SCIT)組、對(duì)照組等。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用了全身體積描記系統(tǒng)(WBP)對(duì)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行了全面的呼吸參數(shù)檢測(cè)；另外也進(jìn)行了免疫球蛋白測(cè)定、阻斷IgG測(cè)定、及對(duì)淋巴細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)以進(jìn)行一系列細(xì)胞因子測(cè)定和細(xì)胞分析。

經(jīng)分析，與皮下免疫治療相比，激光表皮免疫治療引起類似IgG抗體的應(yīng)答。表皮的激光微孔有助于記憶T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的產(chǎn)生。除色屋塵螨提取物（HDM extract)誘導(dǎo)脾細(xì)胞的先天細(xì)胞因子反應(yīng)，這些反應(yīng)部分成功被激光微穿孔表皮治療所抑制。表皮免疫治療引起的治療相關(guān)IgE水平略低于皮下免疫治療，并誘導(dǎo)了具有阻斷能力的IgG，下調(diào)細(xì)胞因子反應(yīng)，并顯著改善了肺功能。

圖6:肺功能和支氣管肺泡灌洗液BALF的細(xì)胞組成。采用全身體積描記法（WBP），在(B)治療前，和經(jīng)過(guò)(A和B)治療后測(cè)定了呼吸間歇(Penh)。數(shù)據(jù)顯示為在逐步增加乙酰甲膽鹼挑戰(zhàn)下Penh曲線下的面積(AUC)。如(B)所示，組內(nèi)治療效果(治療前后)的比較顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。流式細(xì)胞儀分析治療后的支氣管肺泡灌洗液BALF的細(xì)胞組成，顯示每個(gè)BAL恢復(fù)的嗜酸性粒細(xì)胞(C)和CD4+ T細(xì)胞(D)數(shù)量。E) BALF總CD4 +細(xì)胞中FoxP3+細(xì)胞百分比。數(shù)據(jù)以平均值±SD和個(gè)體數(shù)據(jù)點(diǎn)表示(n = 8)， ***P < .001， **P < .01， *P < .05, NS =無(wú)顯著性差異

如圖所示，激光表皮免疫療法能顯著改善肺功能，其表現(xiàn)為Penh(呼吸簡(jiǎn)寫(xiě))的減少，而Penh是WBP測(cè)量的與BALB/c小鼠氣道高反應(yīng)性相關(guān)的替代參數(shù)。與其他參數(shù)相似，除色提取液+EPIT和除色提取液+SCIT比使用硫酸鋁鉀+SCIT顯示出更強(qiáng)效的Penh降低(圖6A)。在所有3個(gè)治療組中（除假治療或未治療組外），Penh顯比為治療前呈現(xiàn)著降低(圖6B)。這與與細(xì)胞浸潤(rùn)BALF的減少有關(guān)(圖6C和D)。治療還導(dǎo)致BALF中FoxP3 + T細(xì)胞的百分比增加，這一比例明顯高于僅EPIT組的未處理小鼠(圖6E)。

皮下注射免疫小鼠或表皮激光微孔免疫小鼠可誘導(dǎo)相似的IgG抗體水平，但表皮激光微孔優(yōu)先誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和下調(diào)T細(xì)胞細(xì)胞因子的產(chǎn)生。這種效果被發(fā)現(xiàn)是激光治療本身的結(jié)果，而非提取物的應(yīng)用。表皮治療致敏動(dòng)物可誘導(dǎo)阻斷IgG，顯著改善肺功能，效果優(yōu)于皮下治療。在整個(gè)治療過(guò)程中，也沒(méi)有發(fā)生局部或全身的副作用。

綜上所述，通過(guò)激光產(chǎn)生的皮膚微孔使用除色屋塵螨HDM提取物進(jìn)行過(guò)敏原特異性免疫治療，為屋塵螨引發(fā)的過(guò)敏和肺部炎癥提供了安全有效的治療選擇。該研究成果對(duì)過(guò)敏藥物的開(kāi)發(fā)及治療手段起了更深一層的啟發(fā)作用，全身體積描記系統(tǒng)WBP無(wú)疑在該實(shí)驗(yàn)與研發(fā)中起了關(guān)鍵作用。

塔望科技在同類進(jìn)口產(chǎn)品上升級(jí)整合，開(kāi)發(fā)出集成化更高的全身體積描記系統(tǒng)（WBP），使操作最簡(jiǎn)化。全身體積描記系統(tǒng)自帶霧化給藥功能，可將致敏原在線霧化激發(fā)，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)動(dòng)物的呼吸肺功能指標(biāo)的變化。還可選擇紅外熱成像功能，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行實(shí)時(shí)不間斷體溫測(cè)量。

WBP系統(tǒng)不僅可以用于哮喘前后肺功能參數(shù)的變化，還可用于睡眠呼吸研究、ARDS、肺纖維化、COPD、呼吸衰竭、藥物評(píng)價(jià)、毒性研究等。具有不同規(guī)格的體積描記器，適用于小鼠、大鼠、犬、猴等動(dòng)物。